Anti-scFv Antibodies 제품을 소개합니다.

single-chain variable fragment (scFv)은 항체의 heavy chains와 light chains의 가변 영역이 15~20개의 아미노산으로 구성된 짧은 펩타이드로 연결된 형태입니다. scFv는 완전한 항원 결합 활성을 유지하면서도 우수한 조직 침투성, 짧은 생체 내 반감기, 낮은 면역원성 등의 장점을 제공합니다. 이러한 특징 덕분에 scFv는 세포 치료, 질병 진단, 약물 전달 등 다양한 분야에서 널리 활용되고 있습니다. GenScript는 scFv 기반 치료제, 이중 특이성 항체 (bsAb), CAR-T 세포 연구를 지원하기 위해 다양한 고품질 anti-scFv 항체를 제공합니다.

[Product Highlights]

[Selection Guide]

* Anti-scFv antibody Cocktail (Min X)은 사람 IgG, 마우스 IgG, 염소 IgG 및 토끼 IgG와 교차 반응성 없습니다.

[Product Performance]

• Versatile Applicability

ELISA 결과, MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)은 다양한 유래의 scFv뿐만 아니라 서로 다른 연결 순서(VH-VL 또는 VL-VH), 다양한 링커, 그리고 BiTE, IgG(H)-(scFv)₂, (scFv)₂-(H)IgG, scFv-Fab-Fc 등 다양한 형태의 scFv 기반 이중특이성 항체를 특이적으로 인식하는 것으로 확인되었습니다.

scFv from different sources, different connection orders (VH-VL or VL-VH), different linkers or different forms of bispecific antibodies are coated on the plate at a concentration of 1 μg/mL; The concentration of MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) ranges from 0.017 ng/mL to 1000 ng/mL; Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb (GenScript, A01856) is used as the secondary antibody, and the dilution ratio is 1:20000.

• High Affinity

Bio-Layer Interferometry(BLI) 기술을 이용한 결과, MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)은 다양한 유래의 scFv, 다양한 연결 순서(VH-VL 또는 VL-VH), 다양한 링커 및 다양한 형태의 scFv 기반 이중특이성 항체에 대해 높은 친화도를 나타내는 것으로 확인되었습니다.

• Versatile Applicability

Western Blot 결과, MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)은 다양한 유래의 scFv 및 이중특이성 항체인 BiTE에 대해 높은 민감도를 나타내는 것으로 확인되었습니다.

Western blot analysis of human scFv, mouse scFv-Fc and bispecific antibody (BiTE) at different concentrations was performed using MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282, 0.1 µg/mL). The signal was detected using Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10)[HRP], mAb, (GenScript, A01856, 1:20,000).

• High Consistency

MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)의 3개 배치는 scFv에 대해 일관된 결합 곡선을 나타냈으며, 각 농도 지점에서 CV 값은 10% 미만으로 확인되었습니다.

The scFv coating concentration was 1 μg/mL; MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) was diluted 3-fold starting from 111 ng/mL; Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb (GenScript, A01856) was used as a detection antibody at a dilution ratio of 1:20000.

• Non-binding blocking

Competition ELISA 결과, Anti-scFv antibody가 scFv에 결합한 후에도 scFv와 표적 항원(target antigen) 간의 결합에는 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었습니다.

In this ELISA assay, the target antigen was coated at a concentration of 1 μg/mL, and scFv was mixed with MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) (with dilutions starting from 3.33 μg/mL) before being added to the antigen-coated plates. Subsequently, THE™ His Tag Antibody [HRP], mAb, Mouse (GenScript, A00612) was utilized as the detection antibody at a dilution of 1:5000.

[Application Data]

• Characterization of CAR-T cells by flow cytometry

GenScript의 Anti-scFv antibody는 scFv 기반 CAR-T 세포에 대해 매우 높은 특이성을 나타냅니다. 실험 결과, 다양한 희석 배수의 Anti-scFv antibody를 사용하여 CAR-T 세포의 양성률을 정확하게 검출할 수 있었으며, 형질도입되지 않은(untransduced) T 세포에 대해서는 매우 낮은 비특이적 결합을 나타냈습니다. 따라서 본 항체는 CAR-T 세포의 특성 분석(characterization)에 활용될 수 있습니다.

The same CAR-T cells were detected using MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 647] (GenScript, A02288) at different dilutions (1:50-1:500). The untransduced T cells and concentration-matched Rabbit IgG [iFluor 647] (GenScript, A02026) were used as controls.

• Comparison of scFv-based CAR-T cell characterization tools

Flow cytometry 결과, Anti-scFv antibody는 CAR-T 세포 특성 분석 시 Protein L 및 Anti-Fab 항체에 비해 더 우수한 세포 군집화(cell clustering) 효과와 더 높은 양성률을 나타내는 것으로 확인되었습니다.

Live pan-CD3+ T cells were isolated from human PBMCs and engineered to express an scFv-based CAR. MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282, 10μg/mL) and concentration-matched FITC-Labeled Recombinant Protein L and Alexa Fluor® 647 AffiniPure Goat Anti-Human IgG, F(ab‘)2 were used to characterize the CAR-T cells. The signal of MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) was amplified using Alexa Fluor® 488 -Labeled Goat Anti-Rabbit IgG.

• Detect the binding of scFv to its target protein by ELISA

Anti-scFv 항체는 human scFv, murine scFv 및 이중특이성 항체가 표적 단백질에 결합하는 능력을 검출하는 데 사용할 수 있습니다.

In this ELISA assay, the target antigen was coated at a concentration of 1 μg/mL, and scFv was utilized within a concentration range from 1.37 ng/mL to 1000 ng/mL. Subsequently, MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) was used as a detection antibody at a concentration of 1 μg/mL, and the signal was amplified using Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb (GenScript, A01856) at a dilution of 1:20,000.

• Detect the binding of scFv to its target cells by flow cytometry

Flow cytometry 결과, Anti-scFv antibody는 scFv가 결합된 세포에 대해서는 높은 특이적 신호를 나타내고, scFv가 결합되지 않은 세포에 대해서는 매우 낮은 비특이적 신호를 나타내는 것으로 확인되었습니다. 따라서 본 항체는 scFv의 표적 세포 결합 능력을 검출하는 데 사용할 수 있습니다.

MonoRab™ Rabbit Anti-scFv Cocktail [FITC] (GenScript, A02284) was used to analyze the binding ability of anti-CD20 antibodies to Raji cells. The blue solid line represents unstained cells, the red solid line represents cells with only A02284 added, and the green solid line represents cells with anti-CD20 scFv and A02284 added.